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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63514 |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
包裝規(guī)格 | 50T |
是否進口 | 否 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
蠟樣芽孢桿菌腹瀉型和嘔吐型毒素基因核酸檢測試劑盒(定性) | 50T | BK-P63514 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品特點
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝,確保即使在低濃度樣本中也能準(zhǔn)確檢測。
操作簡便:試劑盒采用即開即用的設(shè)計,用戶只需提供樣品DNA模板即可進行檢測。
特異性強:引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,針對蠟樣芽孢桿菌毒素基因(如cesB基因)的高度保守區(qū)設(shè)計,避免與其他生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
快速檢測:整個檢測過程可在60分鐘內(nèi)完成,適用于快速診斷。
適用范圍廣:既可用于定性檢測,也可用于定量檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CoC1人細胞 | 無糖DMEM培養(yǎng)基,含L-谷氨酰胺,不含丙酮酸鈉 |
COLO205人細胞 | 低糖DMEM培養(yǎng)基,含L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉 |
COLO320人結(jié)直腸腺癌細胞 | 高糖DMEM培養(yǎng)基,含L一谷氨酰胺,不含丙酮酸鈉 |
COLO320 DM 人結(jié)直腸腺癌細胞 | 高糖DMEM培養(yǎng)基,含L一谷氨酰胺和HEPES,不含丙酮酸鈉 |
COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細胞 | 高糖DMEM培養(yǎng)基,含L一谷氨酰胺和HEPES,無丙酮酸鈉和酚紅 |
COV434人卵巢顆粒細胞 | 高糖減血清DMEM培養(yǎng)基,含非之需氨基酸和丙酮酸鈉,不含L-谷氨酰胺 |
CW-2人細胞 | DMEM/F-12(1:1)培養(yǎng)基,含L一谷氨酰胺和HEPES |
cx-1細胞 | DMEM/F-12(1:1)培養(yǎng)基,含L一谷氨酰胺,不含HEPES |
D283 Med人腦髓母細胞瘤細胞 | 減血清DMEM/F-12(1: 1)培養(yǎng)基,含非必需氨基酸和丙酮酸鈉,不含L一谷氨酰胺 |
D341 Med人腦髓母細胞瘤細胞 | DMEM/F-12(1: 1)培養(yǎng)基,含L一谷氨酰胺, 500 mL 丙酮酸鈉和HEPES,不含酚紅 |
DAMI人巨核細胞細胞 | 蠟樣芽孢桿菌腹瀉型和嘔吐型毒素基因核酸檢測試劑盒(定性)減血清 DMEM/F-12(1:1)培養(yǎng)基,含酚紅,不含L一谷氨酰胺和HEPES |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR