在選購小鼠E選擇素ELISA試劑盒時,實驗人員還需重點關注以下幾個核心參數(shù):
1. 標準曲線范圍與靈敏度
優(yōu)質(zhì)試劑盒的標準曲線應覆蓋0.156-10 ng/mL的生理濃度區(qū)間,最低檢測限(LOD)需≤0.05 ng/mL。若研究涉及低濃度樣本(如炎癥早期),建議選擇高靈敏度版本,避免數(shù)據(jù)出現(xiàn)假陰性。
2. 批間差與穩(wěn)定性驗證
通過查看廠商提供的多批次QC數(shù)據(jù),批間差異應控制在<15%。可要求供應商提供開蓋穩(wěn)定性(如4℃保存7天后回收率≥90%)和凍融循環(huán)(3次循環(huán)后變異系數(shù)<10%)測試報告。
3. 交叉反應驗證
針對小鼠模型的特點,需確認試劑盒對E選擇素同源分子(如P選擇素、L選擇素)的交叉反應率<1%,部分廠商會提供Western blot驗證數(shù)據(jù)作為輔證。
4. 樣本兼容性優(yōu)化
不同樣本類型(血清/血漿/組織勻漿)可能影響檢測結(jié)果。建議優(yōu)先選擇含基質(zhì)校正緩沖液的試劑盒,或要求廠商提供特定樣本類型的預處理方案。例如,對于高脂血癥模型鼠血清,可能需要1:5稀釋以避免脂質(zhì)干擾。
5. 數(shù)據(jù)可追溯性
國際品牌如R&D Systems會為每盒試劑配備唯一批號溯源系統(tǒng),用戶可通過官網(wǎng)查詢該批次所有性能驗證原始數(shù)據(jù),包括標準曲線原始OD值、板間重復性熱圖等。